Trinh Thi Xuan * , Truong Thanh Xuan Lien , Duong Thi Thu Nhi and Tran Van Hai

* Corresponding author (trinhthixuan@ctu.edu.vn)

Abstract

The experiment was aimed to identify species of the entomopathogenic virus by using a traditional method (observing symptoms and describing characteristics) and the molecular method based on PCR amplification with specific primers PSF002 and PER001 for nucleopolyhedrovirus (NPV). There were 29 samples from the diseased larva of the beet armyworm, Spodoptera exigua Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) collected in the Mekong Delta. The results from observation and description of the symptoms, as well as the extraction of DNA and PCR amplification with specific primers PER001 and PSF002 indicated that 20 samples had unique fragments approximated 550 bp which was identified nucleopolyhedrovirus belonged to Baculoviridae family. They include seven strains collected in Vinh Long province, five strains in Dong Thap province, three strains in An Giang province and five strains collected in Can Tho city.
Keywords: Baculoviridae, nucleopolyhedrovirus, PCR, Spodoptera exigua

Tóm tắt

Thí nghiệm được thực hiện nhằm thu thập và định danh vi rút bằng bằng phương pháp truyền thống dựa trên các triệu chứng và kết hợp với việc thực hiện phản ứng PCR với cặp mồi chuyên biệt PSF002 và PER00 1dùng để nhận biết vi rút nucleopolyhedrovirus (NPV). Kết quả đã thu thập được 29 mẫu từ xác của ấu trùng sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) tại Đồng bằng sông Cửu Long. Qua quan sát hình dạng thể vùi, mô tả triệu chứng, kết hợp ly trích DNA và khuếch đại PCR với primer chuyên biệt PER001 và PSF002 cho kết quả có 20 chủng xuất hiện những băng màu có kích thước 550 bp và được xác định là nucleopolyhedrovirus (NPV) thuộc họ Baculoviridae. Trong đó, có bảy chủng vi rút thu thập tại tỉnh Vĩnh Long, năm chủng vi rút thu thập tại tỉnh Đồng Tháp, ba chủng vi rút thu thập tại tỉnh An Giang và năm chủng vi rút thu thập tại thành phố Cần Thơ.
Từ khóa: Baculoviridae, nucleopolyhedrovirus, PCR, sâu xanh da láng

Article Details

References

Đái Duy Ban (2006). Công nghệ gen. Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật Hà Nội.

Evans, H. and M. Shapiro (1997). Viruses. Manual of Techniques in Insect Pathology, Biological Techniques, p 17-53.

Hughes, P. R., H. A. Wood (1981), In vitro and invitro bioassay methods for baculovirus. In: Granados, R.R., Federici, B.A. (Eds), The Biology of Baculoviruses, Vol. 2. CRC Press, Boca Raton, FL, 1-30.

Hughes, P. R., R. R. Gettig, W. J. McCarthy (1986), “A synchronous peroral technique for the bioassay on insect virus”, Journal of Invertebrate Pathology, 41, 256-261.

Jayarajs (1985). Symptoms and pathologies of insect diseases in “Microbial control and integrated pest management. Tamil Nadu Agricultural University, Coimbatore, India, pp 30-33.

Kunimi, Y. (2005), “Current status and prospects on the use of insect pathogens as biocontrol agents”, Agrochemicals Japan, 86, 2-6.

Kunimi, Y. (2007), “Current status and prospects on microbial control Japan”, Journal of Invertebrate Pathology, 95, 181-186.

Kunimi, Y. and M. Nakai (2001). Worshops for Microbial Control Faculty of Agriculture. Tokyo University of Agriculture and Technology. pp. 36.

Miller L.K (1997). The Baculoviruses. Springer Science+Business Media New York Originally published by Plenum Press. ISBN 978-1-4899-1836-9. 447 pp.

Nakai, M., C. Goto, T. Shiotsuki and Y. Kunimi (2001). Granulovirus prevents pupation and retards development of Adoxophyes honmai larvae. Physiological Entomology 27, 157–164.

Nguyễn Thị Thu Cúc (1999). Nghiên cứu sâu xanh da láng (Spodoptera exigua Hubner-Noctuidae-Lepidotera): các đặc điểm hình thái, sinh học, sinh thái, khả năng gây hại và biện pháp phòng trị trên đậu nành (Glycine max (L) Merrill). Đề tài tiến sĩ ngành Nông học. Trường đại học Cần Thơ.

Nguyễn Văn Huỳnh và Lê Thị Sen (2004). Phần B: Côn trùng chính gây hại cây trồng chính ở Đồng bằng sông Cửu Long. Giáo trình côn trùng nông nghiệp. Tủ sách Đại học Cần Thơ.

Phạm Thị Thùy (2004). Công nghệ sinh học trong bảo vệ thực vật. Nhà xuất bản Đại học Quốc gia Hà Nội.

Steiner, P. (1936). Beiträge zur Kenntnis der Schädlingsfauna Klein-Asiens III. Laphyqma exiqua,ein grosschädling der Zuckerrübe in Anatolien. Z. Ang. Entomol. 23: 178-222.

Wilson, J.U (1932). Notes on the biology of Laphygma exigua (Hübner). Florida Entomologist 16:33-39.