Nguyễn Hà Giang * , Lê Hữu Thôi , Trương Quỳnh Như Đặng Thị Hoàng Oanh

* Tác giả liên hệNguyễn Hà Giang

Abstract

A PCR protocol to detect Aeromonas hydrophila infection in kidney of striped catfish (Pangasianodon hypophthalmus) was optimized. The forward primer AeroFd and reverse primer AeroRs were used to amplify Aerolysin gene of A. hydrophila with a PCR product of 209 bp (Panangala et al., 2007). The lower detection limit was 100 pg extracted DNA from striped catfish kidney. The diagnostic sensitivity and specificity of the PCR was evaluated with common bacterial isolates in aquaculture including Vibrio alginolyticus, V. harveyi, Edwardsiella ictaluri, Escherichia coli, Pseudomonas putida. The PCR appears to be useful for rapid and sensitive detection of A. hydrophila in infected striped catfish with much less time being used when compared to biochemical tests.
Keywords: Pangasianodon hypophthalmus, PCR, diagnosis

Tóm tắt

Qui trình PCR phát hiện vi khuẩn Aeromonas hydrophila nhiễm trên thận cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) được thực hiện và chuẩn hóa. Trong qui trình này mồi xuôi AeroFd và mồi ngược AeroRs được sử dụng để khuếch đại gen Aerolysin của A. hydrophila với sản phẩm PCR là 209 bp (Panangala et al., 2007). Độ nhạy của qui trình là 100 pg DNA chiết tách từ thận cá tra. Tính đặc hiệu của qui trình được kiểm tra với vi khuẩn phổ biến trong thủy sản là Vibrio alginolyticus, V. harveyi, Edwardsiella ictaluri, Escherichia coli, Pseudomonas putida. Qui trình có thể ứng dụng để phát hiện nhanh và nhạy A. hydrophila nhiễm trên cá tra so với phương pháp sinh hóa truyền thống.
Từ khóa: Aeromonas hydrophila, Pangasianodon hypophthalmus, PCR, chẩn đoán

Article Details

Tài liệu tham khảo

Bartie, K., D. T. H. Oanh, G. Huys, C. Dickson, M. Cnockaert, J. Swings, N. T. Phương and A. Teale, 2006. Ứng dụng REP-PCR và PFGE để định týp vi khuẩn kháng chloramphenicol phân lập tại các trại nuôi thủy sản ở đồng bằng sông Cửu Long. Tạp chí công nghệ sinh học. 4 (1): 31-40.

Panangala V. S., Craig A. Shoemaker, Vicky L. Van Santen, Kevin Dybvig, Phillip H. Klesius, 2007. Multiplex-PCR for stimultaneous detection of 3 bacteria fish pathogen, Flavobacterium columnare, Edwardsiella ictaluri and Aeromonas hydrophila. Disease of aquatic organisms 74: 199-208.

Taggart, J. B., R . A. Hynes, P. A. Podohl and A. Ferguson, 1992. A simplified protocol for routine total DNA isolate from salmonid fishs. Journal of fish Biology 40: 963-965.