Bùi Thị Bích Hằng *

* Tác giả liên hệ (btbhang@ctu.edu.vn)

Abstract

White spot syndrome virus (WSSV) is one of serious viruses in black tiger shrimp (Penaeus monodon). The aim of this study was making recombinant DNA content of VP28 gene of WSSV for using as antigen to develop antibody. DNA fragment of VP28 was amplified from WSSV, which infected to shrimp and showed specific band 516bp. PCR product was digested by restriction enzyme BamHI and PstI, and cloned to plasmid pUC18 by T4 DNA ligase. Recombinant DNA VP28-pU18 was transformed to Escherchia coli XL1Blue, the E. coli after transformation was examined and showed consisting DNA VP28 of WSSV
Keywords: WSSV, recombinant DNA and restriction enzyme

Tóm tắt

Vi-rút gây bệnh đốm trắng (WSSV) là một trong những vi-rút gây nguy hiểm cho tôm sú (Penaeus monodon). Mục tiêu của nghiên cứu nhằm tạo tái tổ hợp ADN của gen VP28 ở WSSV để sử dụng làm kháng nguyên cho việc phát triển kháng thể. Đoạn ADN của VP28 được khuếch đại từ vi-rút gây bệnh đốm trắng trên tôm sú thông qua biểu hiện vạch sáng đặc hiệu 516bp. Tiến hành phân cắt sản phẩm PCR bằng enzyme giới hạn BamHI và PstI, gắn kết với plasmid pUC18 bằng enzyme T4 DNA ligase. Tổ hợp VP28-pUC18 được biến nạp vào vi khuẩn Escherichia coli XL1Blue, tiến hành kiểm tra khuẩn lạc của vi khuẩn E.coli sau khi biến nạp cho thấy vi khuẩn có mang đoạn ADN VP28 của WSSV.
Từ khóa: WSSV, tái tổ hợp ADN và enzyme giới hạn

Article Details

Tài liệu tham khảo

Chou, H.Y., C.Y.Huang, C.H. Wang, H.C. Chiang and C.F. Lo. 1995. Pathogeneicity of a baculovirus infection causing White Spot Syndrome in cultured penaeid shrimp in Taiwan. Dis. Aquat. Org. 23, 165-173.

Flegel, T.W., Boonyaratpalin S. and Withyachumnarnkul B.. 1997. Current status of research on yellow-head virus and white-spot virus in Thailand. In T.W. Flegel and I. MacRae (eds.) Diseases in Asian Aquaculture III. Fish Health Section, Asian Fisheries Soc, Manila, 285-296.

Hossain,M.S.; Chakraborty, A.;Joseph, B.; Otta, S.K,; Karunasager, I. 2001. Detection of new hosts for white spot syndrome virus of shrimp using nested polymerase chain reaction. Aquaculture, 198,111.

Manual of diagnostic test for aquatic animal, 2006. White spot disease. www.oie.int/eng/normes/finnual.

Parin C., Phiromsak P., Nitaya T., Sombat R., Siwaporn L., Weerawan S., Paisarn S. 2006. Development of a polyclonal antibody specific to VP19 envelope protein of white spot syndrome virus (WSSV) using a recombinant protein preparation. J. Virol. Met.,133, 180–184.

Patricia B., Rafael D. R., Caroline H. S., Mariana B., Patricia H. S., Edmundo C.G. và Aguinaldo R. P. 2011. Molecular Cloning and Recombinant Expression of the VP28 Carboxyl-Terminal Hydrophilic Region from a Brazilian White Spot Syndrome Virus Isolate. Brazilian archives of Biology and technology, 54(2) 399-404

Rajeev Kumar Jha and Zi-rong Xu. 2005. Production of recombinant enveloped structural proteins from the chinese wssv isolate. Indian Journal of Clinical Biochemistry, 20, 136-141.

Witteveldt, J.; Cifuentes, C.C.; Vlak, J.M.; van Hulten, M.C.W. 2004. Protection of Penaeus monodon against white spot syndrome virus by oral vaccination. J. Virol., 78, 2057-2061.