Từ Thanh Dung * , Huynh Thi Ngoc Thanh Nguyen Khuong Duy

* Tác giả liên hệ (ttdung@ctu.edu.vn)

Abstract

This study describes the first isolation Streptococcus iniae as causative agent of ?dark body? disease in climbing perch (Anabas testudineus). A total of 114 diseased climbing perch samples with darkened body colour and lethargy was collected from different commercial farms in the MekongDelta. Diseased fish showed external signs of dark coloration and eyes with corneal opacity. Internally, ascites, hepatomegaly, and splenomegaly were observed. All potential agents were considered. Small, opaque and pure colonies isolated from fish liver, kiney, spleen, blood, eyes and brain on brain heart infusion agar (BHI) and blood agar (BA) were observed in pure culture after 24-36 hours incubating at 28°C. Colonies were chain-forming and Gram positive cocci. Conventional and rapid identification systems and 16S rRNA gene partial sequencing were used to identify the train isolated from ?dark body? disease as Streptococcus iniae. LD50 trials was carried out with two S. iniae isolates, at concentrations from 103 to 106 CFU/mL, in healthy climbing perch (3-6g body weight), with values of 3,73ì103 CFU/mL after 120h and 2,43ì105 CFU/mL after 144h. An experimental injection challenge study fulfilled Koch?s postulates. Experimented showed similar clinical signs to the natural infection.
Keywords: Climbing perch (Anabas testudineus), ?dark body? disease, Streptococcus iniae, LD50

Tóm tắt

Nghiên cứu mô tả lần đầu tiên phân lập vi khuẩn Streptococcus iniae là tác nhân gây bệnh ?đen thân? trên cá rô đồng (Anabas testudineus). Nghiên cứu đã thu được 114 mẫu cá rô đồng bệnh có dấu hiệu đen thân ở các ao nuôi thâm canh khác nhau ở các tỉnh đồng bằng sông Cửu Long. Cá bệnh có dấu hiệu khắp vùng lưng màu đen, mắt cá mờ đục, xuất huyết nội quan, gan, thận và tùy tạng sưng to. Các mẫu cá được kiểm tổng quát các tác nhân gây bệnh. Sau thời gian ủ 24-36 giờ ở 28°C, các khuẩn lạc thuần dạng nhỏ li ti, trắng đục được phân lập từ các mẫu gan, thận, tỳ tạng, máu, mắt và não cá bệnh xuất hiện nhiều trên môi trường brain heart infusion  agar (BHI ) và thạch máu (BA). Quan sát tế bào vi khuẩn nhuộm Gram có hình cầu, dạng chuỗi, Gram dương. Kết quả kiểm tra đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa, kít API 20Strep và giải trình tự gen 16S rRNA đã xác định vi khuẩn phân lập trên cá rô đồng bệnh ?đen thân? là Streptococcus iniae. Hai chủng vi khuẩn S. iniae điển hình được sử dụng để gây thí nghiệm cảm nhiễm trên cá rô đồng giống khỏe (trọng lượng 3-6 g) bằng phương pháp tiêm 4 nồng độ từ 103 đến 106 CFU/mL. ...

Từ khóa: Cá rô đồng (Anabas testudineus), bệnh ?đen thân?, LD50, Streptococcus iniae

Article Details

Tài liệu tham khảo

Agnew, W and A.C. Barnes, 2007. Streptococcus iniae: An aquatic pathogen of global veterinary significance and a challenging candidate for reliable vaccination. Veterinary Microbiology. 122: 1–15.

Barrow, I.G and R.K.A. Feltham (Editor), 1993. Cowan and Steel's manual for the identification of medical bacteria, 3nd edn. Cambridge University Press. 351pp.

Buller, B.N, 2004. Bacteria from Fish and Other Aquatic Animals- A Practical Identification Manual. CABI Publishing. 390pp.

Bromage, S. E, A. Thomas and L. Owens, 1999. Streptococcus iniae, a bacterial infection in barramundi Lates calcarifer. Disease of aquatic Organisms. 36: 177-181.

Bromage, S. E and L. Owens, 2002. Infection of barramundi Lates calcarifer with Streptococcus iniae: effects of different routes of exposure. Disease of aquatic Organisms. 52: 199-205.

Creeper, H.J and N.B. Buller, 2006. An outbreak of Streptococcus iniae in barramundi (Lates calcarifera) in freshwater cage culture. Australian Veterinary Journal. 84: 408-411.

El Aamri, F, D. Padilla, F. Acosta, M.J. Caballero, J. Roo, J. Bravo, J. Vivas and F. Real, 2010. First report of Streptococcus iniae in red porgy (Pagrus pagrus, L.). Journal of Fish Diseases. 33: 901–905.

Ferguson, W, J.A. Morales and V.E. Ostland, 1994. Streptococcosis in aquarium fish. Disease of aquatic Organisms. 19: 1-6.

Frerichs, N.G and S.D. Millar, 1993. Manual for the isolation and identification of fish bacterial pathogens. Pisces Press. U.K. 55pp.

Fishbase,2010.http://www.fishbase.org/Summary/speciesSummary.php?ID=495&genusname=Anabas&speciesname=testudineus&AT=anabas+testudineus&lang=Vietnamese, truy cập ngày 17/12/2010.

Hatai, K and S. Egusa, 1979. Studies on the pathogenic fungus of mycotic granulomatosis-III. Development of the medium for MG-fungus. Fish Pathology. 13: 147-152.

Hoshina, T, T. Sano and Y. Morimoto, 1958. A Streptococcus pathogenic to fish. Journal of the Tokyo University of Fisheries. 44: 57-68.

Humphrey, J. D, C. E. Lancaster, N. Gudkovs and J. W. Copland, 1987. The disease status of Australian salmonids: bacterial and bacteria diseases. Journal of Fish Disease. 10: 403-410.

Lau, P.K.S, P.C.Y. Woo, H. Tse, K.W. Leung, S.S.Y. Wong and K.Y. Yuen, 2003. Invasive Streptococcus iniae infections outside North America. Journal of Clinical Microbiology 41: 1004–1009.

Noga, J. E (Editor), 2010. Fish disease-diagnosis and treatment (2nd Edition). John Wiley & Sons. 538pp.

Nagatsugawa, T, 1983. A streptococcal disease of culture flounder. Fish pathology. 17: 281-285.

Pasnik, J.D, J.J. Evans and P.H. Klesius, 2009. Fecal strings associated with Streptococcus agalactiae infection in Nile tilapia, Oreochromis niloticus. The Open Veterinary Science Journal. 3: 6-8.

Pier, B.G and S.H. Madin, 1976. Streptococcus iniae sp. nov., a Beta-Hemolytic Streptococcus isolated from an Amazon freshwater dolphin, Inia geoffrensis. International journal of Systematic Bacteriology. 26: 545-553.

Perera, P.R, S.K. Johnson and D.H. Lewis, 1997. Epizootiological aspects of Streptococcus iniae affecting tilapia in Texas. Aquaculture. 152 (1-4): 25-33.

Reed, J.L and H.A. Muench, 1938. A simple method of estimating fifty percent end points. The American journal of Hygiene. 27(3): 493-497.

Romalde, L. J, B. Magariños, C. Ravelo and A.E. Toranzo, 2009. Vaccination Strategies to Prevent Streptococcal Infections in Cultured Fish. In: G. Zaccone, C. Perrière, A. Mathis and B.G. Kapoor (Edtior). Fish Defenses. Vol (2) Pathogens, Parasites and Predators. Science Publishers. 403pp.

Roach, J.C, P.N. Levett and M.C. Lavoie, 2006. Identification of Streptococcus iniae by commercial bacterial identification systems. Journal of Microbiology Methods. 27: 20–26.