Từ Thanh Dung * , Nguyễn Bảo Trung Lê Minh Khôi

* Tác giả liên hệ (ttdung@ctu.edu.vn)

Abstract

The bacterium Aeromonas schubertii, was isolated and identified as the aetiological agent causing internal white spot disease in snakehead fish (Channa striata) suffering from high mortality rates within hatchery and commercial farms in 4 provinces: Tra Vinh, An Giang, Dong Thap and Dong Nai. A total of 192 diseased specimens showing white-spot in internal organs was collected from 53 different farms. The typical clinical signs were observed the presence of whitish nodules in the liver, spleen and kidney. The bacteria were isolated with tiny pale yellow colonies on tryptic soya agar after incubating at 28°C for 24-36 hours, and were analyzed as negative Gram and short rod-shaped, motile and oxidase positive. A combination of conventional biochemical tests, API 20E system and 16S rRNA gene partial sequencing was used to identify the all isolates as Aeromonas schubertii. An experimental injection challenge study was performed and fulfilled Koch’s postulates with LD50 values of 6.59x103 and 8.12x103 cfu per ml. Histological examination was found numerous multifocal granulomas in internal organ tissues: liver, spleen and kidney.
Keywords: Aeromonas schubertii, Channa striata, histopathology, infection

Tóm tắt

Vi khuẩn Aeromonas schubertii được phân lập và định danh là tác nhân gây bệnh đốm trắng nội tạng trên cá lóc (Channa striata) gây thiệt hại nghiêm trọng với tỉ lệ hao hụt cao trong các trại giống và ao nuôi thâm canh ở 4 tỉnh như: Trà Vinh, An Giang, Đồng Tháp và Đồng Nai. Tổng số 192 mẫu cá lóc bệnh đốm trắng nội tạng được thu từ 53 ao nuôi khác nhau. Dấu hiệu bệnh lý đặc trưng có các đốm trắng nhỏ ở gan, thận và tỳ tạng. Trên môi trường TSA, vi khuẩn có khuẩn lạc nhỏ màu vàng nhạt, sau 24-36 giờ ủ ở nhiệt độ 28°C, và là vi khuẩn Gram âm, hình que ngắn, di động và oxidase dương tính. Dựa vào đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa, kit API 20E và kết quả giải trình tự gen 16S rRNA, vi khuẩn này được xác định là loài Aeromonas schubertii. Thí nghiệm cảm nhiễm bằng phương pháp tiêm cho thấy vi khuẩn có khả năng gây bệnh với dấu hiệu bệnh lý giống như ngoài ao nuôi, với giá trị LD50 của hai chủng vi khuẩn thí nghiệm là 6,59x103 CFU/mL và 8,12x103 CFU/mL, kết quả này thỏa mãn với định đề Koch. Kết quả kiểm tra mô bệnh học đã quan sát được các u hạt với nhiều hình dạng khác nhau ở mẫu mô gan, thận và tỳ tạng.
Từ khóa: Aeromonas schubertii, cá lóc, cảm nhiễm, Channa striata, mô bệnh học

Article Details

Tài liệu tham khảo

Agius, C. and Roberts, R. J., 2003. Melano-macrophage centresand their role in fish pathology. Journal of Fish Diseases. 26(9): 499-509.

Buller, B. N, 2004. Bacteria from fish and other aquatic animals: a practical identification manual. AMA DataSet. UK, 390 pages.

Cao, H., Hou, S., He, S., Lu, L. and Yang, X., 2013. Identification of a Bacteriovoraxsp. isolate as a potential biocontrol bacterium against snakehead fish-pathogenic Aeromonas veronii. Journal of Fish Diseases. 37(3): 283-290.

Carnahan, A. M., Chakraborty, T., Fanning, G. R., Verma, D., Ali, A., Janda, J. M. and Joseph, S. W., 1991. Aeromonas trotasp. nov., an ampicillin-susceptible species isolated from clinical specimens. Journal of Clinical Microbiology. 29(6): 1206–1210.

Carnahan, A. M., Marii, M. A., Fanning, G. R., Pass, M. A. and Joseph, S. W., 1989. Characterization of Aeromonas schubertiistrains recently isolated from traumatic wound infections. Journal of Clinical Microbiology. 27(8): 1826–1830.

Carol, A., Martinez-Murcia, A. J. and Collins, M. D., 1993. Identification of Aeromonas schubertiiand Aeromonas jandaeiby using a polymerase chain reaction-probe test. FEMS Microbiology Letters. 108(2): 151-156.

Chen, Y. F., Liang, R. S., Zhuo, X. L., Wu, X. T. and Zou, J. X., 2012. Isolation and characterization of Aeromonas schubertiifrom diseased snakehead, Channamaculate (Lacepede). Journal of Fish Diseases. 35(5): 421-430.

Duret, L. and Bucher, P., 1997. Searching for regulatory elements in human non-coding sequences. Current Opinion in Structural Biology. 7(3): 399-406.

Ferguson, H. W., 2006. Systemic Pathology of Fish: a text and atlas of normal tissues in teleostsand their responses in disease,Secondedition. London. 367 pages.

Frerichs, N. G. and Millar, S. D., 1993. Manual for the isolation and identification of fish bacterial pathogens. Pisces Press. U.K. 55pages.

Gauthier, D. T., Rhodes, M. W., Vogelbein, W. K., Kator, H. and Ottinger, C. A., 2003. Experimental Mycobacteriosisin striped bass Moronesaxatilis. Diseases of Aquatic Organisms. 54(2): 105–117.

Hickman-Brenner, F. W, Fanning, G. R., Arduino, M. J., Brenner, D. J. and Farmer, J. J., 1988. Aeromonas schubertii, a new mannitol-negative species found in human clinical specimens. Journal of Clinical Microbiology, 26(8): 1561-1564.

Liu, J. Y. and Li, A. H., 2012. First case of Aeromonas schubertiiinfection in the freshwater cultured snakehead fish, Ophiocephalusargus(Cantor), in China. Journal of Fish Diseases. 35(5): 335–342.

Maurilio, L. F., Gabriel, A. G., Sara, B. B. Z., Karina, Y. S. S and Ana, A. Z., 2014. Identification of Mycobacterium agent isolated from tissues of niletilapia (Oreochromis niloticus). Turkish Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 14(1-2): 575-580.

NguyễnThị NgọcHuyềnvà ĐặngThị HoàngOanh, 2016. Đặc điểm mô bệnh học của cá lóc (Channastriata) bệnh xuất huyết và bệnh gan thận mủ. Tạp chí Khoa học Trường đại học Cần Thơ. 42B(2016): 93-100.

NguyễnThị Thùy Giang, Dương Văn Quý Bình và Đỗ Thị Hòa, 2013. Nghiên cứu bước đầu về bệnh đốm trắng nội tạng ở cá chim vây vàng (Trachinotusblochii) nuôi ở Nha Trang. Đại học Nha Trang. Hội nghị khoa học trẻ ngành thủy sản toàn quốc. 427-437.

Rajendirane, A., Natarajan, E. and Subramanian, P., 2008. Control of Aeromonas hydrophilainfection in spotted snakehead, Channapunctatus, by Solanum nigrum L., a Medicinal Plant. Journal of the world aquaculture society. 39(3): 375-383.

Reed, J. L and Muench, H. A., 1938. A simple method of estimating fifty percent end points. The American journal of Hygiene. 27(3): 493-497.

Sinh, L. X., Navy, H., and Pomeroy, R. S., 2014. Value chain of snakehead fish in the lower Mekong Basin of Cambodia and Vietnam. Aquaculture Economics & Management. 18(1): 76-96.

Tagle, D. A., Koop, B. F., Goodman, M., Slightom, J. L., Hess, D. L. and Jones R. T., 1988. Embryonic epsilon and gamma globin gens of a prosimian primate (Galago crassicaudatus). Nucleotide and amino acid sequences, developmental regulation and phylogenetic footprints. Journal of Molecular Biology. 203(2): 439-455.

Talpur, A. D., Munir, M. B., Mary, A. and Hashim, R., 2014. Dietary probiotics and prebiotics improved food acceptability, growth performance, haematologyand immunological parameters and disease resistance against Aeromonas hydrophilain snakehead (Channastriata) fingerlings. Aquaculture. 426–427: 14–20.

Thompson, J. D., Gibson T. J., PlewniakF., JeanmouginF. and Higgins D. G., 1997. The CLUSTALX windows interface: flexible strategies for multiple sequence alignment aided by quality analysis tools. Nucleic Acids Research. 25(24): 4876-4882.

Dung, T. T., Ngoc, N. T. N., Thinh, N. Q., Thy, D. T. M., Tuan, N. A., Shinn, A. and Crumlish, M., 2008. Common diseases of Pangasius Catfish farmed in Vietnam. Global Aquaculture Advocate,11: 76-77.

Zheng, W., Cao, H. and Yang, X., 2012. Aeromonas veroniiinfection in the cultured snakehead fish, Ophiocephalusargus(Cantor). 6(44): 7218-7223.