Hoàng Ngọc Khánh * Nguyễn Thị Pha

* Tác giả liên hệ (hnkhanh@ctec.edu.vn)

Abstract

This research aimed to find the suitable medium supporting the regeneration of Dendrobium Sonia PLB based on analysis of two factors: carbon sources and light conditions. Murashige and Skoog (1962) medium with added agar 6.5 g/L and vitamins (thiamine, pyridosine with 0.5 m/L for each) were used. The research consisted of Experiment 1 with sucrose, D-glucose, D-fructose and Experiment 2 ebstablished by mixing carbon sources medium in both lab light (fluorescent white light) and natural light. The data on the percentage of newly created PLB over two months were analyzed using ANOVA and LSD (5%) method. The results revealed that the medium adding 20 mg/L sucrose under fluorescent white light was the most suitable conditions for the generation of PLB with 614,5 PLB regenerated. Experiment 2 showed that the medium mixing of 15 mg/L D-glucose and 15 mg/L D-fructose under fluorescent white light was the best medium for the generation of PLB of Dendrobium Sonia with 735,7 PLB after two months.
Keywords: Carbon source, Dendrobium Sonia, protocorm-like bodies, tissue culture

Tóm tắt

Mục đích của nghiên cứu nhằm tìm môi trường nuôi cấy thích hợp cho sự nhân mật số thể tiền chồi của lan Dendrobium Sonia dựa trên 2 nhân tố: nguồn carbon và chế độ ánh sáng. Môi trường nuôi cấy của Murashige và Skoog (1962) bổ sung agar 6,5 g/L và vitamin (thiamine, pyridosine với 0,5 m/L mỗi loại) được sử dụng. Nghiên cứu gồm: Thí nghiệm 1 với đường sucrose, D-glucose, D-fructose và Thí nghiệm 2 gồm hỗn hợp các loại đường được tiến hành trong hai chế độ ánh sáng: đèn huỳnh quang và ánh sáng tự nhiên. Thành phần phần trăm (%) PLB được tạo trong 2 tháng được phân tích ANOVA và phép so sánh cặp LSD 5%. Kết quả cho thấy môi trường có bổ sung nồng độ đường 20 mg/L sucrose và dưới chế độ ánh sáng đèn huỳnh quang có mật độ nhân PLB tốt nhất với 614,5 PLB được tạo thành. Thí nghiệm 2 cho thấy môi trường hỗn hợp 15 mg/L D-glucose và 15 mg/L D-fructose tạo điều kiện nhân mật số tốt nhất với 735,7 PLB được tạo sau 2 tháng nuôi cấy in vitro.
Từ khóa: Dendrobium Sonia, nguồn carbon, nuôi cấy mô, thể tiền chồi

Article Details

Tài liệu tham khảo

Batista, D. S., Felipe, S. H. S., Silva, T. D., et al, 2018. Light quality in plant tissue culture: does it matter? In: Vitro cellular and developmental biology – plant. New York. 54(3): 195–215.

Bauer, J., Hiltbrunner, A. and Kessler, F. 2001. Molecular biology of chloroplast biogenesis: gene expression, protein import and intraorganellar sorting. Cell Mol. Life Sci. 58: 420-433.

Chugh, S., Guha, S., Rao IU, 2009. Micropropagation of orchids: A review on the potential of different explants. Scientia Horticulturae122: 507-520.

Dodds, J. H. and Roberts, L. W., 1985. Experiments in plant tissue culture. second edition. Cambridge University Press. New York. 348 pages.

Fang, S. C., Chen, J. C.,,Wei, M. J., 2016. Protocorms and Protocorm-Like Bodies Are Molecularly Distinct from Zygotic Embryonic Tissues in Phalaenopsis aphrodite. Plant Physiology Preview. 171(4): 2682-2700.

Kozai, T., 2016. Why LED lighting for urban agriculture? In: KozaiT, Fujiwara K, Runkle E (eds) LED lighting for urban agriculture. Springer. 3–18.

Habiba, S. U., Shimasaki, K. and Kochi, M. M. A., 2014. Effects of different light quality on growth and development of Protocorm-Like Bodies (PLB) in Dendrobiumkingianumcultured in vitro. Bangladesh Research Publications Journal. 10(2): 223–227.

Hart, J. W., 2012. General introduction. In: Hart JW (ed) Light and plant growth. Topics in plant physiology. Springer Science and Business Media. 1: 4–17.

Hew, C., Ting, S. and Chia, T., 1988. Substrate utilization by Dendrobium tissues. Botanical Gazette. 149(2): 153-157.

Jones, D., Tisserat, B., 1990. Clonal propagation of orchids. Methods Mol Biol 6: 181-191.

Mayer, J. L. S., Stancato, G. C. and Appezzato-Da-Glória, B., 2010. Direct regeneration of protocorm-like bodies (PLB) from leaf apices of OncidiumflexuosumSims (Orchidaceae). Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 103(3): 411–416.

Murashige, T. and Skoog, F., 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacotissue culture. PhysiologiaPlantarum. 15: 473-497.

Ngô Thanh Phú và NguyễnBảo Toàn, 2014. Ảnh hưởng phối hợp của màu sắc ánh sáng và chất điều hòa sinh trưởng lên sự sinh trưởng in vitro của lan Dendrobium. Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ. Số Chuyên Đề: Nông Nghiệp. (4): 57-62.

NguyễnThị Pha, TrầnThị Xuân Mai, Lê Thị Mai Trang và NguyễnThị Liên, 2011. Nuôi cấy mầm ngủ phát hoa lan hồ điệp (Phalaenopsis sp.). Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ. (20b): 15-20.

Tokuhara, K. and Mii, M., 2003. Highly-efficient somatic embryogenesis from cell suspension cultures of phalaenopsis orchids by adjusting carbohydrate sources. In Vitro Cellular and Developmental Biology – Plant. 39: 635.

Teixeira, J., Giang, D. T. T., Chan, M. T., et al, 2007. The Influence of Different Carbon Sources ,Photohetero- , Photoauto- and PhotomixotrophicConditions on Protocorm- Like Body Organogenesis and Callus Formation in Thin Cell Layer Culture of Hybrid Cymbidium (Orchidaceae), Orchid Science and Biotechnology 1: 15-23.

Uddain, J., Gnasekaran, P., Zakaria, L., Lynn, C. B. and Subramaniam, S., 2015. The effect of different growth media, carbon source and PGRs on Dendrobium Broga Giant orchid’s protocorm-like bodies (PLB) proliferation supported with SEM and TEM analysis. Pakistan Journal of Botany. 47(2): 587–593.

Udomdee, W., Wen, P. J., Chin, S. W. and Chen, F. C., 2015. Effect of carbon source on protocorm-like body induction, proliferation and regeneration in Dendrobium snowflake “red star.” Acta HorticulturaeInternational Society for Horticultural Science (ISHS). 1078: 113-120.

Restanto, D. P., Santoso, B., Kriswanto, B. and Supardjono, S, 2016. The application of chitosan for protocorm like bodies (PLB) induction of Orchid (Dendrobium sp) In Vitro. Agriculture and Agricultural Science Procedia. 9: 462–468.

Koch, K.E., 1996. Carbohydrate-modulated gene expression in plants. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 47: 509-540.