Đặng Thị Hoàng Oanh * , Jung Tae Sung , Huỳnh Kim Nguyên Nguyễn Hoàng Nhật Uyên

* Tác giả liên hệ (dthoanh@ctu.edu.vn)

Abstract

This study was conducted to evaluate the immune response of striped catfish (Pangasianodon hypophthalmus) to attenuated Edwardsiella ictaluri bacteria. Agglutination test was used to quantify the level of specific antibody from striped catfish weekly after soaking with different concentrations of the attenuated bacteria (2ì104-8 CFU/mL) and control group. The challenge test by injecting virulent E.ictaluri (1.5ì105 CFU/fish) were done at 2 weeks post exposure. The results showed that specific antibody against E.ictaluri of all experimented fishes were detected at 2nd week after soaking. Antibody titers increased quickly at the 3rd week, following by a gradual rise. In 6th week, the highest titer from treatments was found in treatment 1ì108 with level 9.0 which was significant difference (p<0.05) from the control group (2.0). In addition, group soaking with 1ì108 CFU/mL of the attenuated bacteria showed significant lower mortality (25%) (p<0.05) compared to control group (70%). These results demonstrated that using attenuated E.ictaluri at concentration of 1ì108 CFU/mL can stimulate striped catfish generate specific antibody against E.ictaluri infection in experimental condition.
Keywords: Pangasianodon hypophthalmus, immune response, Edwardsiella ictaluri, attenuated vaccine

Tóm tắt

Nghiên cứu được thực hiện nhằm xác định khả năng sinh kháng thể đặc hiệu của cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) cảm nhiễm vi khuẩn Edwardsiella ictaluri nhược độc. Phương pháp ngưng kết được sử dụng để xác định hiệu giá(?) kháng thể đặc hiệu của cá tra sau mỗi tuần ngâm cá với vi khuẩn E.ictaluri nhược độc ở các nồng độ 2ì104, 1,5ì105, 2ì106, 2ì107, 1ì108 CFU/mL và đối chứng. Sau 2 tuần, cá tra được cảm nhiễm với chủng E.ictaluri có độc lực với nồng độ 1,5ì105 CFU/mL. Kết quả cho thấy mức kháng thể của cá ở tất cả các nghiệm thức tăng dần từ tuần thứ 2, tăng nhanh đến tuần thứ 3 sau khi ngâm vi khuẩn nhược độc và cao nhất đến cuối giai đoạn khảo sát. Trong đó, cá ở nghiệm thức ngâm vi khuẩn nhược độc 1ì108 CFU/mL có hiệu giá kháng thể trung bình tăng cao nhất (gần 9,0), khác biệt có ý nghĩa so với nhóm đối chứng (chỉ 2,0) (p<0,05). Ngoài ra, cá tra ở nghiệm thức ngâm vi khuẩn nhược độc 1ì108 CFU/mL có tỉ lệ chết thấp nhất (25%) trong khi đó ở nhóm đối chứng tỉ lệ cá chết là 70% (p<0,05). Qua những kết quả trên cho thấy cá tra trong điều kiện thí nghiệm khi ngâm E.ictaluri nhược độc nồng độ 1ì108 CFU/mL có khả năng tạo kháng thể đặc hiệu chống lại vi khuẩn E.ictaluri.
Từ khóa: Pangasianodon hypophthalmus, đáp Ứng miễn dịch, Edwardsiella ictaluri, vaccine nhược độc

Article Details

Tài liệu tham khảo

Amend, D.F, 1981. Potency testing of fish vaccines. Dev. Biol. Standard., 49, 447-454.

Aoki, T. 1988. Drug resistance plasmids from fish pathogens. Microbiol. Sci. 5:219–223.

Bartie, K., D. T. H. Oanh, G. Huys, C. Dickson, M. Cnockaert, J. Swings, N. T. Phương and A. Teale, 2006. Ứng dụng REP-PCR và PFGE để định týp vi khuẩn kháng choloramphenicol phân lập tại các trại nuôi thủy sản ở đồng bằng sông Cửu Long. Tạp chí Công nghệ Sinh học. 4 (1): 31-40.

Crumlish, M., T.T. Dung, J.F. Turnbull, N.T.N. Ngoc, and H.W. Ferguson. 2002. Identification of Edwardsiella ictalurifrom diseased freshwater catfish, Pangasius hypophthalmus(Sauvage), cultured in the Mekong Delta, Vietnam. J. Fish Dis. 25:733–736.

Dung, T.T., Haesebrouck, F., Sorgeloos, P., Tuan, N.A., Baelem M., Smet, A., Decostere, A., 2009. IncK plasmid-mediated tetracycline resistance in Edwardsiella ictaluri isolates from diseased freshwater catfish in Vietnam. Aquaculture. Volumn 295. Isuess 3-4. 16 October 2009, Pages 157-159.

Đặng Thị Hoàng Oanh và Đặng Thuỵ Mai Thy (2009). Nghiên cứu ứng dụng qui trình PCR chẩn đoán vi khuẩn Edwardsiella ictaluri trên thận cá tra (Pangasianodon hypopthalmus). Báo cáo hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc. Công nghệ sinh học phục vụ Nông-Lâm nghiệp, Thủy sản, Công nghiệp, Y-Dược và bảo vệ môi trường. Thái Nguyên, ngày 26-27 tháng 11, 2009. Mã số 04-09/ĐHTN-2009.

Đặng Thị Hoàng Oanh và Nguyễn Trúc Phương, 2009. Phát hiện vi khuẩn Edwardsiella ictalurigây bệnh mủ gan trên cá tra (Pangasianodon hypophthamus)bằng phương pháp PCR. Tạp chí khoa học. Khoa Thủy sản, Đại học Cần Thơ. 151-159.

Ferguson, H.W., J.F. Turnbull, A. Shinn, K. Thompson, T.T. Dung, and M. Crumlish, 2001. Bacillary nercrosis in farmed Pangasius hypophthalamus(Sauvage) from the Mekong Delta, Vietnam. Journal of Fish Diseases 24:509-513.

Houston, H.A., 1990. Blood and circulation. In: C.B. Schreek and P.B. Moyle. Method for biology. American Fish society Bethesda, Maryland, USA. 665: 273-322.

Muiswinkel W. B., Wiegertjes G. F., 1997. Immune responses after injection vaccination of fish. Fish vaccinology 90: 55-57.

Nakanishi T., Ototake M., 1997. Antigen uptake and immune response after immersion vaccination. Fish vaccinology 90: 59-68.

Nguyễn Thị Mộng Hoàng, Nguyễn Thị Hiền, Nguyễn Diễm Thư, Nguyễn Mạnh Thắng, 2009. Định danh và thăm dò đặc tính gây đáp ứng miễn dịch của tác nhân gây bệnh đốm trắng mủ trên cá tra (Pangasianodon hypophthalmus)nuôi ở Đồng bằng sông Cửu Long. Tuyển tập nghề cá sông Cửu Long.

Nguyễn Trọng Bình, 2008.Tác nhân gây bệnh đốm trắng trên gan, thận (bệnh mủ gan) và hướng ngăn ngừa bệnh. http://www.hcmbioech.com.vn/Salient new detail.php?id=19. Ngày truy cập 09/5/2013.

Panangala V. S., Craig A. Shoemaker, Vicky L. van Santen, Kevin Dybvig, Phillip H. Klesius, 2007. Multiplex-PCR for simultaneous detection of 3 bacterial fish pathogen, Favobacterium columnare, Edwardsiella ictaluri, and Aeromonas hydrophyla. Dieases of aquatic organisms 74: 199-208.

Phạm Thành Công, 2010. Khảo sát đáp ứng miễn dịch của cá tra (Pangasianodon hypophthalmus)nhiễm vi khuẩn Edwardsiella ictaluri.Luận văn cao học. Khoa Thủy Sản, Đại học Nông Lâm.

Roberson, B.S., Stolen, J.S., Fletcher, T.C., Anderson, D.P., Roberson, B.S. and Muiswinkel, W.B., 1990. Bacterial agglutination. In: Techniques in Fish Immunology, 81–86.

Sarter, S., Kha, N.H.N., Hung, L.T., Lazard, J. and Didier Montet., 2007. Antibiotic Resistace in Gram-negative bacteria isolated from farmed catfish. Food Control 18 (2007) p.1391-1396.

Thune R. L., Hawke J. P., Ferandez D. H. And Lawrence M. L., 1997. In: Gudding, R., Lillehaug, A., Midtlyng, P.J., Brown, F.(Eds), Fish Vaccinology, Dev. Biol. Stand. Karger Basel P. 125-134.

Từ Thanh Dung, M.Crumlish, Nguyễn Thị Như Ngọc, Nguyễn Quốc Thịnh và Đặng Thị Mai Thy, 2004. Xác định vi khuẩn gây bệnh trắng gan trên cá tra (Pangasius hypophthamus). Tạp chí Khoa học, khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ. 137-142.

Vinitnantharat S and Plumb, 1993. Dis. Aquat. Org. 15: 31-34. Wise, D.J., T.E. Schwedler and D.L. Otis, 1993. Effects of stress on susceptibility of naive channel catfish in immersion challenge with Edwardsiella ictaluri. Journal of Aquatic Animal Health 5:92-97.

Yuasa, K., E. B. Kholidin, N. Panigoro, K. Hatai, 2003. First isolation of Edwarsiella ictalurifrom cultured striped catfish Pangasius hypophthalmusin Indonesia. Fish Pathology 38(4): 181-183.