Từ Thanh Dung * , Nguyễn Thị Tiên Nguyễn Anh Tuấn

* Tác giả liên hệ (ttdung@ctu.edu.vn)

Abstract

Bacterium Flavobacterium columnare was recovered and identified as the aetiological agent causing white patch diseasein farmed catfish Pangasianodon hypophthalmus fingerlings, suffering from high mortality rates within commercial hatchery and ponds in the Mekong Delta.White patch disease on freshwater catfish show clinical signs such as: decreasing mucus, white patch on the sadblack, eroded fins and greyish white gills. Observing wet samples under microscope, this bacterium was gliding motility. The bacteria were isolated on Cytophaga agar. Isolates on the agar produced yellow-pale colonies, flat that rhizoid edges after 48h at 28oC. Biochemical characterization with its absorption of Congo red dye, production of flexrubin-type pigments long filamentous, negative Gram, gelatin hydrolysis, reducing nitrate, no product acid from carboxylases, negative with urea.An experimental immersion challenge study was performed and fulfilled Kochs postulates with LD50values of 1.7 x 105cfu per ml and 3.2 x 106cfu per ml for isolates FC-HN and FC-CT, respectively.Histological examination with two Haematocylin & Eosin and Giemsa staining, were found numerous long filamentous bacteria on/in skin-muscular, gills and liver tissues. Using sevenantibioticsforsusceptibility testing on thrity isolates thatwas included in the study.To the best of our knowledge this is the first report of freshwater columnaris infection in P. hypophthalmus.
Keywords: Pangasianodon hypophthalmus, Flavobacterium columnare and treatment, ,

Tóm tắt

Vi khuẩnFlavobacterium columnaređược xác định là tác nhân gây bệnh trắng đuôi trên cá tra (Pangasianodon hypophthalmus). Khi bệnh này xuất hiện gây hao hụt rất cao trong ao ương nuôi cá tra thâm canh ở đồng bằng sông Cửu Long. Cá tra bệnh trắng đuôi có biểu hiện đặc trưng như: cá mất nhớt, có vệt trắng trên thân, đuôi bị ăn mòn, mang xám nhạt, Quan sát mẫu tươi dưới kính hiển vi thấy vi khuẩn này di động dạng trượt. Các chủng vi khuẩn được phân lập trên môi trường Cytophaga agar cho khuẩn lạc có sắc tố vàng, dạng rễ sau 48 giờ ở 28ºC. Vi khuẩn có dạng hình que mảnh, dài, thuộc vi khuẩn Gram âm. Vi khuẩn này có khả năng hấp thu congo red, tạo sắc tố vàng nâu từ phản ứng flexirubin, thủy phân gelatin, tạo nitrite từ nitrate nhưng không có khả năng tạo axit từ các loại đường, âm tính với urê. Kết quả cảm nhiễm 2 chủng vi khuẩn (FC-HN2) và (FC-CT2) trên cá tra giống khỏe đã thỏa mãn định đề Kochs, với giá trị LD50trên 2 chủng vi khuẩn F. columnare (FC-HN2) và (FC-CT2) lần lượt là 1,7x105và 3,2x106cfu/ml. Quan sát mô học với 2 phương pháp nhuộm là Haematocylin & Eosin và Giemsa đã tìm thấy từng đám vi khuẩn dạng sợi mảnh ở mô da, cơ, mang và tỳ tạng. Kiểm tra kháng sinh đồ trên 30 chủng vi khuẩn F. columnare vời 7 loại thuốc kháng sinh được thực hiện trong nghiên cứu này.Vi khuẩn gây bệnh trắng đuôi được nghiên cứu đầu tiên trên cá tra.
Từ khóa: Cá tra, Pangasianodon hypophthalmus, Flavobacterium columnare, điều trị

Article Details

Tài liệu tham khảo

Anonymous. 1986 . Treatment of columnaris disease. For Fish Farmers No. 86-1. Mississippi Cooperative Extension Service, Mississippi State University, p. 1-2.

Bader, J.A.., S.A. Moore and K.E. Nusbaum, 2006. The effect of cutaneous injury on a reproducible immersion challenge model for Flavobacterium columnare infection in channel Catfish (Ictalurus punctatus). Aquacuture 253: 1-9.

Buller, N.B. (Editor), 2004. Bacteria from fish và other aquatic animal: A practical identify Cytophaga agar manual. 361pp.

Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). 2008. Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals; approved standard, third edition, M31-A3, Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, USA.

Craig, S.T., J.A. Hargreaves, 2004. Biology and culture of chanel catfish. Science. 676pp.

Dash, S.S., B.K. Das, P. Pattnaik, S.K. Samal, S. Sahu and S. Ghosh, 2009. Biochemical và serologicial characterization of Flavobacterium columnare from freshwater fishes of Eastern India. Journal of the World Aquaculture Society. 40: 236 – 247.

Decostere A, 1998. Characterization of four Flavobacterium columnare (Flexibacter columnaris) strains isolated from tropical fish. Veterinary Microbiology 62: 35-45.

Decostere, A., F Haesebrouck, J. F. Turnbull and G. Charlier, 1999. Influence of water quality and temperature on adhesion of high và low virulence Flavobaterium columnare strains to isolated gill arches. Journal of Fish Disease. 22: 1-11.

Decostere, A. 1999 Flavobacterium columnare infection in fish: The agent và its adhesion to the gill tissue. Ph.D thesis. Universiteit Ghent. 152pp.

Dung T. T., Haesebrouck F., Tuan N. A., Sorgeloos P., Baele M. and Decostere A. 2008. Antimicrobial susceptibility pattern of Edwardsiella ictaluri isolates from natural outbreaks of bacillary necrosis of Pangasianodon hypophthalmus in Vietnam. Microbial Drug Resistance. 14: 311-316.

Ellis, A.E., 1999. Immunity to bacteria in fish. Fish & Shellfish Immunology 9 (4): 291-308.

Ferguson, H.W. (editor) 2006. Systemic pathology of fish: Atext và atlas of normal tissues in teleosts và their responses in disease. Scotian press. 367 pp.

Frerichs, G.N. and S.D. Millar, 1993. Mannual for the isolate and indentification of fish bacterial pathogent. Institute of aquaculture, University of Stirling, Scotland. 107pp.

Hawke JP & RL Thune, 1992. Systemic isolation and antimicrobial susceptibility of Cytophaga columnaris from commercially reared channel catfish. Journal of Aquatic Animal Health 4: 109-113.

Hibiya, T., 1982. An atlas of fish histology: normal and pathological features. 147pp.

Hilger I., S. Ullrich, K. Vàers, 1991. A new ulcerative Flexibacteriosis – like disease (yellow pest) affecting young atlantic cod Gadus morhua from the German wadden sea. Disease Aquatic Organisms. 11: 19-28.

Holt, R.A., J.E. Svàers, J.L. Fryer và K.S. Pilcher, 1975. Relation of water temperature to Flexibacter columnaris infection in steelhead trout (Salmo gairdneri), coho (Oncorhyncus kisutch) and chinook (Oncorhynsus tschowytscha) salmon. Fisheries Reseach Board of Canada. 32: 1553-1555.

Ibarrow, G., and R.K.A. Feltham (editior), 1993. Cowan và Steel,s manual for the identification of medical bacteria. 262pp.

Kunttu, H.M.T., L. Soumalaimen, E.I. Jokinen and E.T. Valtonen, 2009. Flavobacterium columnare colony types: Connection to adhesion và virulence. Microbial Pathogenesis. 46: 21-27.

Morris, J.M., E. Snyder-conn, J.S. Foott, R.A. Holt, M.J. Suedkamp, H.M. Lease, S.J. Clearwater, J.S. Meyer, 2006. Survival of lost River Suckers (Deltistes luxatus) chanllenged with Flavobaterium columnare during exposure to sublethal ammonia concentration at pH 9.5. Environment Contam. Toxiacol. 50: 256-263

Pacha, R.E. and S. Porter, 1968. Characteristics of myxobacteria isolate from the surface of freshwater fish. Microbiology. 16: 1901-1906.

Phuong, N.T., D.T.H. Oanh, T.T. Dung, and L.X. Sinh. 2005. Bacterial resistance to antimicrobials use in shrimps and fish farms in the Mekong Delta, Vietnam. In Proceedings of the International Workshop on antibiotic resistance in Asian Aquaculture Environments. Chiang May, Thaïland. ISBN 88-901344-3-7

Pilarski, F., A.J. Rossini and P.S. Ceccarelli, 2008. Isolation và characterization of Flavobacterium columnare (Bernardet et al., 2002) from four tropical fish species in Brazil. Journal of Biology. 68: 409-414.

Plumb, J.A., 1999. Health maintenance và principal microbial disease of culture fishes.

Roberts, R. (1989) (edition). Fish pathology. 465pp.

Salyers, A.A. and D.D. Whitt, 1996. Bacterial pathologenesis: A molecular approach. 418pp.

Sarker, M.G.A., M.A.R. Faruk, M.B.R. Chowdhury and M.N. Uddin, 2002. Virulence and drug sensitivity of Flavobaterium columnare, the causative agent of columnaris disease, the causative agent of columnaris disease. Biological Science. 5: 204-207.

Sarter, S., Kha, N. H. N., Hung, L.T., Jérôme Lazard, J. & Montet, D. 2007 Antibiotic resistance in Gram-negative bacteria isolated from farmed catfish. Food Control 18: 1391-1396.

Soltani, M., B.L. Munday, C.M. Burke, 1996. The relative susceptibility of fish to infection by Flexibacter columnaris và Flexibacter maritimus. Aquaculture. 140: 259-264.

Soumalainen, L., 2005. Flavobaterium columnare in finfish farming characterisation và putative disease management strategies. Thesis Ph.D. 1456-9701. ISBN. 951-39-2147-6.

Thomas-Jinu, S. and Goodwin, A.E., 2004. Morphological and genetic characteristics of Flavobacterium columnare isolates: correlations with virulence in fish. Journal of Fish Disease. 27: 29-35.

Tripathi, N.K., K.S. Latimer, C.R. Gregory, B.W. Ritchie, R.E. Wooley and R.L. Walker, 2005. Development và evaluation of an experimental model of cutaneous columnaris disease in koi Cyprinus cytophaga agarrpio. Veterinary Diagnosis Investment. 17: 45-54.

United States Deparment of Agriculture, 2003. Reference of 2002 U.S. Cytophaga agar fish health và production practices. Center for Epidemiology và Animal Health, Fort Collins, Colorado. 64-67.