Chiêm Tiểu Quyên , Hồng Đức Ân , Nguyễn Ngọc Khánh , Lê Thị Thủy Tiên Lê Thanh Khang *

* Tác giả liên hệ (lthanhkhang@gmail.com)

Abstract

In this study, petioles, leaf blades, juvenile root, and epicotyls of L14 peanut were used as source materials for micropropagation. The results revealed that dual disinfection with 2.5 percent NaOCl and 0.5 mL Tween20 solution for 5 minutes for the first time and for 15 minutes for the second time is an efficient sterilization method used for peanut seed. On MS medium supplemented with 10 mg/L 2,4-D, the proportion of callus formation from leaf blades was highest (100%). The structure and color of their callus were spongy and green in treatments supplemented with 2,4-D concentration of 5 mg/L, leaf-induced callus showed the highest shoot regenerating ability on medium treated with 2,4-D 1.25 mg/L and BA 1 mg/L. The highest rooting rate achieved on medium supplemented with NAA 0.2 mg/L and with non-reducing MS content (100%).

Keywords: Callus, in vitro culture, micro propagation, peanut, sterilization

Tóm tắt

Nghiên cứu này được thực hiện với nguồn vật liệu từ cuống lá, phiến lá, rễ mầm và trục thượng diệp của giống lạc L14. Kết quả nghiên cứu cho thấy công thức khử trùng hiệu quả đối với mẫu hạt lạc là khử trùng kép bằng dung dịch NaOCl 2,5% và 0,5ml Tween20 trong thời gian lần 1 là 5 phút, lần 2 là 15 phút, giữa 2 lần mẫu được rửa sạch bằng nước cất tiệt trùng ít nhất 3 lần. Sau 3 tuần nuôi cấy trên nền môi trường MS có bổ sung 10 mg/L 2,4-D, mẫu cấy từ phiến lá cảm ứng tạo mô sẹo cao nhất: 100%. Môi trường 2,4-D nồng độ 5 mg/L cho mô sẹo dạng chắc và xanh, mô sẹo cảm ứng từ phiến lá tạo chồi cao nhất trên môi trường bổ sung 2,4-D 1,25 g/L và BAP 1 mg/L. Tỉ lệ tạo rễ từ chồi cảm ứng từ mô sẹo phiến lá cao nhất trên môi trường bổ sung NAA 0,2 mg/L và với hàm lượng đa lượng MS 100%.

Từ khóa: Lạc, mô sẹo, nuôi cấy mô, sự khử trùng, vi nhân giống

Article Details

Tài liệu tham khảo

Aruna, M. M., & Niranjana, S. C. (2016). In vitro rapid regeneration through direct organogenesis and ex-vitro establishment of Cucumis trigonus Roxb. - An underutilized pharmaceutically important cucurbit. Industrial Crops and Products, 83, 48 – 54. https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2015.12.036

Barna, K. S., & Wakhlu, A. K. (1994). Whole plant regeneration of Cicer arietinum from callus cultures via organogenesis. Plant Cell Rep, 13, 510 - 513. https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2015.12.036

Bhatia, C. R., Murty, G. S. S., & Mathew, V. H. (1985). Regeneration of plants from de-embryonated peanut cotyledons cultured without nutrients and agar. Z Pflanzenzuchtig, 94, 149 - 155.

Bhavya, B., Dilta, B. S., Gupta, Y. C., Dhiman, S. R., & Manju, M. (2013). Studies on micropropagation of gerbera (Gerbera jamesonii Bolus). Indian Journal of Applied Research, 3(11), 8 - 11. https://doi.org/10.15373/2249555X/NOV2013/4

Cheng, M., Hsi, D. C. H., & Phillips, G. C. (1992). In vitro regeneration of Valencia type peanut (Arachis hypogaea L.) from cultured petioles, epicotyl sections and other seedling explants. Peanut Sci, 19, 82 - 87. https://doi.org/10.3146/i0095-3679-19-2-5

Daimon, H., & Mii. (1991). Multiple shoot formation and plant regeneration from cotyledonary node in peanut (Arachis hypogaea L.). Japan J Breed, 41, 461 - 466. https://doi.org/10.3146/i0095-3679-19-2-5

Fei, G., Xu, L., Xing, H., Yangling, Z., Xiujing, H., Min, L., Haijian, L., Huanwei, P., Lujiang, L., Zhiming, Z., Guangtang, P., & Yaou, S. (2016). Genome-wide analysis of transcription factors involved in maize embryonic callus formation. Physiologia Plantarum, 158(4), 452 – 462. https://doi.org/10.3146/i0095-3679-19-2-5

Kiên, D. C. (2002). Nuôi cấy mô thực vật. Nhà xuất bản Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh.

Iqbal, M. M., Nazir, F., Iqbal, J., Tehrim, S., & Zafar, Y. (2011). In vitro micropropagation of peanut (Arachis hypogaea) through direct somatic embryogenesis and callus culture. Int. J. Agric. Biol., 13, 811 - 814.

Lavanya, A. R., Muthukrishman, S., Muthukumar, M., Franklin, J. H. B., Senthil, T. K., Kumaresan. V., & Rao, M. V. (2014). Indirect organogenesis from various explants of Hildegardia populifolia (Roxb.) Schott & Endl. – A threatened tree species from Eastern Ghats of Tamil Nadu, India. Journal of Genetic Engineering and Biotechnology, 12(2), 95 – 101. https://doi.org/10.3146/i0095-3679-19-2-5

Limbua, P. G., Ngugi, M. P., & Oduo, R. O. (2019). In vitro regeneration protocol of kenyan adapted groundnut (Arachis hypogaea L.) genotypes using cotyledonary node explants. J Plant Biochem Physiol, 7, 33. https://doi.org/10.4172/2329-9029.1000233

Murashige, T., & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue cultures. Physiol, Plant, 15, 473 - 497. https://doi.org/10.1111/j.1399-3054.1962.tb08052.x

Lượng, N. D., & Tiên, L. T. T. (2002). Công nghệ tế bào. Nhà xuất bản Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh.

Thạch, N. Q., Anh, N. T. L., Ngọc, P. K., Minh, T. V., & Thảo, N. T. P. (2009). Cơ Sở Công nghệ Sinh học – Tập 3 – Công nghệ sinh học Tế Bào. Nhà xuất bản Giáo dục Việt Nam.

Paduchuri, P. Y., Deogirkar, G. V., Kamdi, S. R., Kale, M. C., & Rajurkar, M. D. (2010). In vitro callus induction and root regeneration studies in Gerbera jamesonii. International Journal of Advanced Biotechnology and Research, 1(2), 87 - 90.

Palanivel, S., Parvathi, S., & Jayabalan, N. (2002). Callus induction and plantlet regeneration from mature cotyledonaury segments of groundnut (Arachis hypogaea L.). Journal of Plant Biology, 45(1), 22 - 27. https://doi.org/10.1007/BF03030428

Priyanka, S., & Anita, R. G. (2014). Micropropagation of Ficus religiosa L. via leaf explants and comparative evaluation of acetylcholinesterase inhibitory activity in the micropropagated and conventionally grown plants. Biotech, 4, 477 – 491. https://doi.org/10.1007/s13205-013-0175-8

Siwach, P., & Gill, A. R. (2011). Enhanced shoot multiplication in Ficus religiosa L. in the presence of adenine sulphate, glutamine and phloroglucinol. Physiology and Molecular Biology of Plants. https://doi.org/10.1007/s12298-011-0074-6

Su, Y. H., Liu, Y. B., & Zhang, X. S. (2011). Auxin–Cytokinin interaction regulates meristem development. Molecular plant, 4(4), 616 – 625. https://doi.org/10.1007/s12298-011-0074-6

Sun, H. W., Nair, A., & Adachi, T. (2000). Campbell plant regeneration from cotyledon tissues of common buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench). In Vitro Cellular and Developmental Biology Plant, 36, 358 - 361. https://doi.org/10.1007/s11627-000-0063-x

Thủy, V. T. T., Tâm, N. T., & Mậu, C. H. (2013). Tạo dòng lạc chịu hạn bằng công nghệ tế bào thực vật. Tạp chí Sinh học, 35(3), 357 – 362.