Trần Diệu Thái * , Nguyễn Văn Du , Đỗ Đăng Giáp , Trịnh Thị Hương Trần Trọng Tuấn

* Tác giả liên hệTrần Diệu Thái

Abstract

Ngoc Linh ginseng (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) is a precious ginseng with high economical value, which is an endemic plant of Vietnam. In this study, experiments on the effects of sucrose concentrations and various sizes of erlenmeyer flasks and bioreactors were carried out to determine the appropriate medium for the growth of cell suspension. The results of sucrose concentration showed that the highest biomass obtained from the treatment of MS medium (Murashige and Skoog, 1962) supplemented with 1.5 mg/L NAA and 50 g/L sucrose (37.4 mg/mL of fresh weight and 3.6 mg/mL of dry weight). In 3 L, 5 L and 10 L bioreactor, the growth of cell suspension increased 2.1–2.3 times higher than the initial callus biomass after 4 weeks. The culture in liquid medium of 500 mL erlenmeyer flasks on rotary shaker at 120 rpmshowed that  the amount of cell suspension was increased and reached to the highest yield (50.2 mg/mL of fresh weight and 3.2 mg/mL of dry weight).
Keywords: Bioreactor, cell suspension, liquid shake culture, Ngoc Linh ginseng (Panax vietnamensis Ha et Grushv.), sucrose

Tóm tắt

Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) là một loại sâm quý có giá trị kinh tế cao, là loại thực vật đặc hữu của Việt Nam. Nghiên cứu này khảo sát ảnh hưởng của nồng độ đường sucrose bổ sung và thể tích bình nuôi cấy trong hệ thống nuôi cấy lỏng lắc và bioreactor để xác định môi trường thích hợp cho sự gia tăng sinh khối của tế bào huyền phù. Kết quả thí nghiệm cho thấy nồng độ đường cho tăng trưởng của huyền phù tế bào đạt tốt nhất trong môi trường MS (Murashige and Skoog, 1962) có bổ sung 1,5 mg/L NAA và 50 g/L sucrose (khối lượng tươi và lượng khô lần lượt là 37,4 mg/mL và 3,6 mg/mL). Nuôi cấy trong hệ thống bioreactor 3 L, 5 L và 10 L thì huyền phù tế bào tăng trưởng tốt với lượng sinh khối thu được gấp 2,1 đến 2,3 lần so với lượng mẫu mô sẹo ban đầu sau 4 tuần. Kết quả chỉ ra khi được nuôi cấy trong bình tam giác 500 mL ở điều kiện lỏng lắc với tốc độ 120 vòng/phút, lượng tế bào huyền phù tăng sinh từ dịch huyền phù tế bào ban đầu đạt tốt nhất khi so sánh với các nghiệm thức khác (khối lượng tươi và lượng khô thu được lần lượt là 50,2 mg/mL và 3,2 mg/mL).
Từ khóa: Bioreactor, huyền phù tế bào, nuôi cấy lỏng lắc, Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.), sucrose

Article Details

Tài liệu tham khảo

Bùi Văn Lệ và Nguyễn Ngọc Hồng, 2006. Ảnh hưởng của chất điều hoà tăng trưởng thực vật và đường saccharose lên dịchnuôi cấy huyền phù tế bào dừa cạn Catharanthus roseus. Tạp chí Phát triển Khoa học và Công nghệ. 9(6): 59-66.

Dương Tấn Nhựt, Trần Thị Thu Hà, Trịnh Thị Hương, Hoàng Văn Cương và Nguyễn Phúc Huy, 2012. Nghiên cứu hình thành mô sẹo và tế bào đơn cây kiwi(Actinidia deliciosa). Tạp chí Sinh học. 34(4): 505-514.

Ket, N.V., Anh, T.T.L. and Dung, N.H.U., 2012. Effecting of sucrose concentrations and inoculum density on adventitious root growth in cell suspension culture ofPanax vietnamensisand initially growth in a bioreactor. Southeast-Asian Journal ofSciences. 1(2): 215-222.

Lê Thị Thuỷ Tiên, Bùi Trang Việt và Nguyễn Đức Lượng, 2006. Tìm hiểu về sự tăng trưởng của dịch treotế bào Taxus wallichianaZucc. Tạp chí Phát triển Khoa học và Công nghệ. 9(5): 47-51.

Murashige, T. and Skoog, F., 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum. 15: 473-497.

Nguyễn Thượng Dong, Trần Công Luận và Nguyễn Thị Thu Hương, 2007. Sâm Việt Nam và một số cây thuốc họ Nhân sâm, 1. Khoa học và Kỹ thuật, 422 trang.

Nguyễn Trung Thành và Paek Kee Yoeup, 2008. Nhân nhanh rễbất định Nhân sâm Panax ginseng C.A. Meyer: ảnh hưởng của một số nhân tố lý hoá lên sự tăng trưởng sinh khối và sản phẩm trao đổi chất ginsenosides. Tạp chí Khoa học Đại học Quốc gia Hà Nội, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ. 24: 318-323.

Phạm Thị Mỹ Trâm và Lê Thị Thuỷ Tiên, 2012. Khảo sát sự tăng trưởng của huyền phù tế bào Dâu tây Fragaria ananassaL. có khả năng sinh tổng hợp anthocyanin. Tạp chí Phát triển Khoa học và Công nghệ. 15(1): 69-77.

Thanh, N.T., Ket, N.V. and Paek, K.Y., 2007. Effecting of medium composition on biomass and ginsenoside production in cell suspension culture ofPanax vietnamensis Ha et Grushv. VNU Journal of Science, Natural Sciences and Technology. 23: 269-274.

Tuan, T.T., Dieu-Hien, T., Hoang, C.N., Dieu-Thai, T., Huyen-Trang, N.T., Giap, D.D. and Ho, N.H., 2017. Biomass accumulation ofPanax vietnamensis in cell suspension cultures varies with addition of plant growth regulators and organic additives. Assian Pacific Journal of Tropical Medicine. 10(9): 907-915.

Yu, K.W., Hahn, E.J. and Paek, K.Y., 2003. Ginsenoside production by hairy root cultures ofPanax ginseng C.A. Meyer in bioreactors. Acta Horticulturae. 597: 237-243.